1 引言
作為一種典型的有毒難降解有機廢水，焦化廢水的成分極其復雜，具有水質水量變化大、有機物特別是難降解有機物含量高等特點，并因其含有大量的酚、氰、苯等有毒有害物質，超標排放的焦化廢水對環境會造成嚴重的污染，嚴重威脅人類的身體健康;另外，其有毒有害物質對微生物生長有抑制作用，生物降解極慢，導致這類廢水難以用常規生化方法處理，并且其處理工藝復雜、成本高，是目前水污染防治研究的熱點與難點，研究新方法和新技術以解決此廢水帶來的日益突出的環境問題十分必要.
目前在對焦化廢水處理研究中，出現了許多新工藝、新技術，如高級氧化技術以及其它化學方法等.但是，盡管這些新技術、新方法也能達到較高的處理效果，但都存在一個共同的缺點，即工程投資或/和運行成本極高，實際工程一般難以承受.因此，盡管生物處理也存在一定的問題，但是由于它的低成本，使其仍是研究難降解有機廢水處理的主要方法.
白腐真菌(P. chrysosporium)能夠產生木質素降解酶系統，主要包括過木質素過氧化物酶(LiP)和錳過氧化物酶(MnP)等，可降解環境中的許多難降解有機污染物，在含難降解有機物廢水處理中具有巨大的潛在應用價值.然而，無論國內還是國外，幾乎都是直接采用白腐真菌處理難降解廢水，盡管有研究者將好氧污泥和白腐真菌混合對難降解有機廢水開展過研究，但很少有研究者關注將其它的生物處理單元耦合白腐真菌處理單元對難降解有機廢水開展研究.
根據焦化廢水成分極其復雜、有機物特別是難降解有機物含量高的特點，我們擬開展焦化廢水的白腐真菌直接處理和好氧-厭氧污泥耦合白腐真菌處理研究，探討采用常規生物法耦合白腐真菌處理單元處理焦化廢水的可行性，為白腐真菌廢水處理技術的應用奠定基礎.
2 材料與方法
2.1 焦化廢水
焦化廢水取自云南解化清潔能源開發有限公司解化化工分公司，該公司主要是以褐煤為原料的煤化工企業.此廢水的COD約為6097 mg · L-1，NH3-N約為351 mg · L-1，色度達12022，PH約為 8.9.
2.2 菌種
采用的白腐真菌菌種是由本實驗室保存的黃孢原毛平革菌(P. chrysosporium BKM2F21767);好氧污泥馴化的菌種取自昆明第三污水處理廠，厭氧污泥馴化的菌種取自昆明理工大學校園中水處理站.
2.3 接種用白腐真菌的培養
培養反應器接種物所用培養基的主要成分為：10 g · L-1的葡萄糖;0.8 g · L-1的酒石酸銨;2 g · L-1的磷酸二氫鉀;0.5 g · L-1的硫酸鎂;0.1 g · L-1的氯化鈣;0.175 g · L-1的硫酸錳;0.0001 g · L-1的維生素B1;70 mL · L-1的微量元素(Tien and Kirk 1988);乙酸與乙酸鈉為緩沖溶液將pH值調節為4.5.
反應器接種的固定化P. chrysosporium的培養(周成，文湘華，2009).載體采用打結綿線載體(Zhou and Wen， 2009)，培養是在250 mL的三角瓶中完成.其培養體系包括：100 mL的培養基;40個打結棉線載體(250 g · L-1的載體投加量);孢子的接種量為1×105 個 · mL-1.培養溫度采用37 ℃，在轉速為120 r · min-1的搖床上培養2～3 d.
2.4 好氧污泥和厭氧污泥的馴化
好氧污泥的馴化過程：取2 L污水處理廠的好氧污泥作菌種加入塑料桶(4 L)內，加入稀釋1倍的1000 mL焦化廢水后，悶曝.每天悶曝23 h，溶解氧控制在1～2 mg · L-1左右，靜置1 h;開始時，每兩天排放100 mL廢水，再加入100 mL焦化廢水.30 d后，調高進水為200 mL.但每兩天排放200 mL廢水，再加入200 mL焦化廢水.50 d后，污泥呈淺黑色，沉淀時泥水界面由開始邊緣清晰，中期逐漸模糊，后期逐漸變得邊緣清晰，COD和NH3-N去除率均在30%以上且污泥沉降比(SV)約12%時完成馴化.
厭氧污泥的馴化過程：取2 L污水處理廠的厭氧污泥作菌種加入密閉塑料桶(4 L)內，加入稀釋1倍的1000 mL焦化廢水后，混勻.每隔8 h混勻1次，然后靜置約8 h;開始時，每3 d排放100 mL廢水，再加入100 mL焦化廢水.30 d后，仍然每隔8 h混勻1次，靜置約8 h時;但每3 d加入200 mL焦化廢水，排放200 mL廢水.60 d后，污泥呈淺黑色細小顆粒狀，沉淀時泥水界面變得邊緣清晰，COD和NH3-N去除率均在30%以上且污泥沉降比(SV)約20%時完成馴化.
2.5 反應器結構及其運行步驟
各處理單元的反應器見圖 1.
?圖1 焦化廢水各處理單元的序批式反應器
1)固定化P. chrysosporium的處理單元
處理在柱狀反應器(半徑：12 cm;高：25 cm;工作體積約：2.7 L，圖 1a)中完成，反應器內的底部安置環形微孔曝氣管，采取序批式的運行方式運行，相關參數為：固定化菌絲的投加量約1.76 g · L-1;進水采用1 L · min-1的流速，進水時間2.5 min，污水進水量2.5 L;曝氣階段的運行時間20 d，溶解氧控制在0.5～1 mg · L-1左右;沉淀階段的時間為60 min;排水采用1 L · min-1的流速，排水時間2.5 min;待機為0 h.
2)好氧污泥組合厭氧污泥處理單元
好氧污泥處理單元是在柱狀反應器(半徑：12 cm;高：25 cm;工作體積：3 L，圖 1b)中完成，反應器內的底部安置曝氣頭，采取序批式的運行方式運行，相關參數為：進水采用1 L · min-1的流速，進水時間1 min，污水進水量1 L;曝氣階段的運行時間3 d，溶解氧控制在1～2 mg · L-1左右;沉淀階段的時間為60 min;排水采用1 L · min-1的流速，排水時間1 min，排除1 L處理廢水，留約2 L混合液，目的是對投加的原水進行稀釋，減少對污泥的影響;待機為24 h.
厭氧污泥處理單元是在柱狀反應器(半徑：9 cm;高：28 cm;工作體積：3 L，圖 1c)中完成，反應器安置攪拌器(60 r · min-1)，采取序批式的運行方式運行，除處理階段采用厭氧條件外，其余運行參數同好氧污泥處理單元的相關參數一致.
3)白腐真菌對好氧污泥組合厭氧污泥工藝出水的處理單元
處理在1000 mL(工作體積約：500 mL，圖 1d)的三角瓶中完成，采取序批式的運行方式運行，相關參數為：固定化菌絲的投加量約1.76 g · L-1;進水采用1 L · min-1的流速，污水進水量400 mL;處理階段是在轉速為120 r · min-1的搖床上進行，運行時間3 d;沉淀階段的時間為30 min;排水采用1 L · min-1的流速，排水時間1 min;待機為0 h.
由于污泥生長極其困難，因此在運行期間都沒考慮排泥.此外，各試驗均采用COD和氨氮為考察指標，其COD采用快速消解分光光度法(HJ/T399-2007)測定;氨氮的濃度采用納氏試劑分光光度法測定.
3 結果與討論
3.1 P. chrysosporium對焦化廢水的直接處理
固定化P. chrysosporium直接對焦化廢水的處理結果如圖 2所示.
?圖2 固定化P. chrysosporium對焦化廢水的處理
由圖可見，固定化P. chrysosporium能夠有效去除廢水中的有機污染物.經過每批連續20 d的運行，第一批次的COD由6097 mg · L-1降低至2462 mg · L-1，去除率達60%.氨氮由351 mg · L-1降低至68 mg · L-1，去除率達81%;在第二批次中，COD降低至2611mg · L-1，去除率達57%，且氨氮由降低至70 mg · L-1，去除率達80%.另外，就COD的去除而言，達到13%的去除需要約4 d的處理時間，達到29%的去除需要約8 d的處理時間(圖 2)，這表明若需要固定化P. chrysosporium直接對焦化廢水的處理達到較好的處理效果，其需要的處理時間長.而白腐真菌對廢水處理的水力停留時間一般在3 d左右，如Zhou et al.(2013)對染料的降解僅需3 d的水力停留時間.因此，盡管固定化P. chrysosporium能夠有效去除廢水中的有機污染物，但固定化P. chrysosporium直接對焦化廢水的處理周期過長，即使經過20 d的連續處理，出水卻還是難以達排放標準，在實際工程中采用固定化P. chrysosporium直接對焦化廢水的處理無疑會加大處理成本.因此，將白腐真菌處理單元放在焦化廢水處理工藝的前端值得商榷.若需在焦化廢水的處理中考慮采用白腐真菌技術，需要考慮將白腐真菌處理單元放置在焦化廢水處理工藝的恰當位置，如考慮將其放在其它生物處理單元之后，形成諸如好氧-厭氧污泥耦合P.chrysosporium處理工藝.然而，前期的研究者往往只考慮直接采用白腐真菌對難降解有機廢水直接進行處理(周成等，2014;Zhang et al., 2012; Patel et al., 2013; Cruz-Moratò et al., 2014; Gros et al., 2014; Ottoni et al., 2014);盡管有研究者將好氧污泥和白腐真菌混合對難降解有機廢水開展過研究(Novotny et al., 2011; Wang et al., 2012; Hai et al., 2012;Nguyenet al., 2014 )，但很少有研究者關注常規生物法耦合白腐真菌單元對難降解有機廢水進行處理.然而，我們的試驗結果卻表明：盡管白腐真菌能夠有效處理焦化廢水，但其過長的處理周期使得將其放在焦化廢水處理工藝的前端值得商榷.因此，采用常規生物法耦合白腐真菌單元對難降解有機廢水進行處理是值得嘗試的思路.
3.2 好氧污泥組合厭氧污泥對焦化廢水的處理
盡管固定化P. chrysosporium可以直接對焦化廢水進行有效處理，但處理周期過長，因此考慮采用常規的好氧污泥和厭氧污泥對焦化廢水進行預處理，再考慮采用固定化P. chrysosporium對預處理的出水進行進一步降解，其預處理結果如圖 3和圖 4所示.
?圖3 好氧污泥對焦化廢水的處理
?圖4 厭氧污泥對好氧污泥出水的處理
由于焦化廢水有機物特別是難降解有機物含量高等特點，并因其含有大量的酚、氰和苯等有毒有害物質，這對微生物的生長不利.因此，試驗采用SBR的運行方式，且對處理后的廢水僅部分排放，剩余的處理廢水對新進的原水進行稀釋，減少有毒有害物質對微生物的不利影響，保證污泥的活性.此法直接使原水的COD由6097 mg · L-1降低至4034~4114 mg · L-1的范圍內，且氨氮由351 mg · L-1降低至279~289 mg · L-1的范圍內(圖 3).在8個批次的連續運行中，因好氧污泥作用，COD最終降低至2995～3113 mg · L-1，去除率達23%~27%;氨氮最終降低至238~253 mg · L-1，去除率達12%~17%(圖 3).考慮稀釋和好氧污泥的作用，COD和氨氮的最終去除率分別為49%~51%和28%~32%(圖 3).
進一步采用厭氧污泥對好氧污泥處理出水進行處理，其運行方式相同于好氧污泥法，結果見圖 4.由圖可見，由于稀釋的作用，好氧污泥的處理出水COD直接由2995~3113 mg · L-1降低至2051~2085 mg · L-1，且氨氮由248~253 mg · L-1降低至164~173 mg · L-1的范圍內(圖 3和圖 4).在8個批次的連續運行中，因厭氧污泥作用，COD最終降低至1634~1684 mg · L-1，去除率為19%~21%.氨氮最終降低至102-117 mg · L-1，去除率為31%~37%(圖 4).考慮稀釋和厭氧污泥的作用，COD和氨氮的最終去除率分別為45%~47%和51%~57%(圖 3).
綜合考察好氧-厭氧污泥對焦化廢水的處理結果表明，焦化廢水的COD由6097 mg · L-1降低至1634~1684 mg · L-1范圍，去除率達到72%~73%，氨氮由351 mg · L-1降低至102~117 mg · L-1的范圍，去除率達67%~71%.
3.3 白腐真菌對好氧污泥組合厭氧污泥工藝出水的處理
在好氧污泥組合厭氧污泥處理的基礎上，繼續采用固定化的P. chrysosporium對好氧污泥組合厭氧污泥工藝出水進行處理，結果如圖 5所示.
?圖5 固定化P.chrysosporium對好氧-厭氧污泥工藝出水的處理
由圖可見，好氧-厭氧污泥處理后的出水能夠被白腐真菌進一步降解.在8個批次的連續運行中，COD由1634~1684 mg · L-1范圍降低至1322~1372 mg · L-1，去除率為18%~25%;氨氮由102~117 mg · L-1的范圍降低至16~62 mg · L-1，去除率達46%~85%.
就好氧-厭氧污泥耦合白腐真菌處理單元對焦化廢水的降解而言，其每一操作單元的處理時間為3 d，且COD由6097 mg · L-1范圍降低至1226~1372 mg · L-1，去除率達77%~80%;氨氮由351 mg · L-1的范圍降低至16~62 mg · L-1，去除率達82%~95%.盡管最終的出水的COD和氨氮未能達到排放標準，但此結果卻能夠表明：好氧-厭氧污泥耦合P.chrysosporium處理焦化廢水可在更短的處理周期內完成比直接采用白腐真菌的處理更好的處理效果.其原因可能在于白腐真菌產生木質素降解酶系統對難降解污染物的降解是在限碳和限氮的條件下進行，直接采用白腐真菌處理6097 mg · L-1 COD和351 mg · L-1氨氮的焦化廢水可能難以達到合成木質素降解酶系統的限碳和限氮條件，但采用好氧和厭氧污泥對焦化廢水中的有機碳和氮進行消耗，利于達到木質素降解酶系統的合成條件，對促進白腐真菌對廢水的處理，縮短處理時間有利.可見，白腐真菌的處理不但需考慮其生長，還需考慮如何促進其合成木質素降解酶系統的合成，這可能是發揮白腐真菌處理單元作用所必須考慮的問題.具體參見 污水處理技術資料或污水技術資料更多相關技術文檔。
因此，就處理效果和運行周期而言，采用常規生物法如好氧污泥組合厭氧污泥工藝對焦化廢水進行預處理繼而采用白腐真菌進行處理的思路合理可行.
4 結論
1)盡管固定化P. chrysosporium能有效去除廢水中的有機污染物，COD和氨氮去除率達57%和80%以上，但20 d的處理時間使得直接采用白腐真菌處理焦化廢水的思路值得商榷.
2)在好氧-厭氧污泥耦合白腐真菌處理焦化廢水中，每個操作單元均采用3 d的處理時間，最終COD和氨氮的去除率分別達77%~78%和82%~95%，這表明：好氧-厭氧污泥耦合P. chrysosporium處理焦化廢水可在更短的處理周期內完成比直接采用白腐真菌處理更好的處理效果.
3)采用白腐真菌技術處理難降解有機廢水并不意味直接采用白腐真菌對難降解有機廢水進行處理，針對廢水的特點采用其它的方法耦合白腐真菌處理單元的處理是可以縮短處理周期，且效果可能優于直接采用白腐真菌對難降解有機廢水進行處理的效果.因此，就處理效果和運行周期而言，采用常規生物法如好氧污泥組合厭氧污泥工藝對焦化廢水進行預處理繼而采用白腐真菌進行處理的思路合理可行.
