1 引言

　　近年來, 隨著紡織印染工業(yè)的發(fā)展, 我國染料產(chǎn)量日益增長(zhǎng).其中, 蒽醌染料具有結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、易于合成和顏色亮麗等良好性能, 作為高端染料呈現(xiàn)出良好的發(fā)展勢(shì)頭.1-氨基蒽醌-2-磺酸(ASA-2)不僅是一種合成蒽醌染料的中間體, 而且可經(jīng)過溴化合成重要的蒽醌染料中間體溴氨酸, 其水溶液色彩鮮艷.高產(chǎn)能下, 蒽醌染料及其中間體在生產(chǎn)、合成和使用過程中有相當(dāng)比重直接被排放到環(huán)境中, 成為工業(yè)廢水的重要污染源.在我國淡水資源短缺、水體污染加劇和環(huán)境問題凸顯的大背景下, 蒽醌染料及其中間體的無害化處理受到了廣泛關(guān)注.生物方法因其能耗小、二次污染少和環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛采用.已報(bào)道許多微生物如Bacillus benzeovorans、Rhodopseudomonas XL-1、Citrobacter sp. C-7和Pichia pastoris SMD1168H能夠降解蒽醌染料及其中間體.然而工業(yè)廢水體系復(fù)雜, 含多種復(fù)合成分, 如多種蒽醌類化合物及其中間體共存, 高鹽, 有一定的酸堿度等, 這些都給降解菌株的底物廣譜性及惡劣環(huán)境耐受性提出了新的挑戰(zhàn).因此, 篩選出高效、廣譜性且能夠適應(yīng)工業(yè)廢水復(fù)雜環(huán)境條件的降解菌株對(duì)工業(yè)蒽醌染料廢水處理尤為重要.

　　近年來, 嗜吡啶紅球菌憑借其對(duì)難降解污染物獨(dú)特的降解能力受到了許多學(xué)者的關(guān)注, 成為一類具有潛力的新型微生物資源.已有文獻(xiàn)報(bào)道, 嗜吡啶紅球菌可以降解多氯聯(lián)苯、石油充氧劑甲基叔丁醚、內(nèi)分泌干擾物玉米烯酮和4-硝基甲苯等多種環(huán)境污染物.可見, 嗜吡啶紅球菌在污染物治理方面有著巨大潛力, 但尚未有關(guān)于蒽醌染料及中間體降解方面的報(bào)道.

　　本實(shí)驗(yàn)室從受溴氨酸污染的泥土中篩選分離出一株新的蒽醌染料中間體1-氨基蒽醌-2-磺酸(縮寫為ASA-2)降解菌, 通過形態(tài)學(xué)觀察和16S rDNA序列分析, 鑒定其為嗜吡啶紅球菌(Rhodococcus pyridinovorans).以ASA-2為模式污染物, 研究了菌株GF3對(duì)其生物脫色的特性, 并鑒定了ASA-2降解的終產(chǎn)物.此外, 研究發(fā)現(xiàn)該菌株還能夠降解溴氨酸、蒽醌-2-磺酸鈉和蒽醌-2-羧基等蒽醌化合物.

　　2 材料和方法

　　2.1 實(shí)驗(yàn)材料

　　菌株分離所用的泥土樣品取自國內(nèi)浙江臺(tái)州某染料工廠排污口溴氨酸污染的泥土.1-氨基蒽醌-2-磺酸(縮寫為ASA-2)由大連理工大學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供, 分子量為303, 配置成5.0 g·L-1的ASA-2母液待用.氨基酸購買于Solarbio公司;甲醇、乙酸和三乙胺為高效液相色譜純;其他試劑均為國產(chǎn)分析純.

　　2.2 培養(yǎng)基

　　富集培養(yǎng)基：蛋白胨10.0 g·L-1, 酵母膏5.0 g·L-1, NaCl 10.0 g·L-1(pH 7.2).

　　無機(jī)鹽培養(yǎng)基：KH2PO40.5 g·L-1, Na2HPO4·12H2O 0.82 g·L-1, 0.002 5 g·L-1 FeCl3(pH 7.0).

　　2.3 實(shí)驗(yàn)方法

　　2.3.1 菌株的篩選

　　將10 g污泥樣品投加到200 mL富集培養(yǎng)基(含50 mg·L-1的ASA-2)中培養(yǎng)后, 取培養(yǎng)液接入漸減的富集培養(yǎng)基(酵母膏和蛋白胨含量是上一個(gè)培養(yǎng)基的一半)中馴化, 當(dāng)培養(yǎng)基中ASA-2完全褪色后轉(zhuǎn)接到下一個(gè)培養(yǎng)基內(nèi), 接種量為10%(體積比).經(jīng)過大約40 d的馴化培養(yǎng), 反復(fù)不斷平板涂布, 最后選出1株具有較強(qiáng)降解能力的菌株(命名為GF3), 保存在15%甘油水溶液中置于-80 ℃冰箱.

　　2.3.2 菌體形態(tài)及16S rDNA測(cè)序

　　用掃描電鏡(SU80IO, Japan Hitachi)觀察菌株GF3的外觀形態(tài), 放大倍數(shù)為10000倍.16S rDNA的測(cè)序工作由大連寶生物公司完成, 將測(cè)得的序列用BLAST軟件與GenBank中已知的16S rDNA序列進(jìn)行同源性比較.

　　2.3.3 菌體生長(zhǎng)量與ASA-2濃度的測(cè)定

　　菌體干重X(g·L-1)與菌液濁度(OD660nm)存在線性關(guān)系, 經(jīng)實(shí)驗(yàn)得OD660nm=4.009 7 X + 0.0553(R2=0.9872).測(cè)量樣品溶液在660 nm下的吸光度, 然后根據(jù)上述公式轉(zhuǎn)換成菌體干重濃度.ASA-2濃度C(mg·L-1)測(cè)定采用分光光度計(jì)(JASCO UV-560, Japan)法, 即從ASA-2脫色體系取菌液在10000 r·min-1下離心5 min, 取上清液在ASA-2特征吸收波長(zhǎng)處(475 nm)測(cè)量其吸光度, 根據(jù)ASA-2濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線C=55.189 OD475 nm-0.7637(R2=0.9990)換算為濃度.ASA-2脫色率的計(jì)算公式：

　　(1)

　　式中, C0和Ct分別表示初始時(shí)刻和t時(shí)刻底物的濃度(mg·L-1).

　　表 1 外加營養(yǎng)物質(zhì)的組成

　　2.4 脫色條件優(yōu)化

　　將保藏在-80 ℃冰箱中的菌種接入20 mL無機(jī)鹽培養(yǎng)基(含0.6 g·L-1酵母膏, 20 mg·L-1ASA-2)中, 于30 ℃、150 r·min-1培養(yǎng)至ASA-2完全脫色后, 按2%(體積比)的接種量將菌液接入50 mL無機(jī)鹽培養(yǎng)基(含2.0 g·L-1酵母膏, 50 mg·L-1 ASA-2)中擴(kuò)大培養(yǎng).當(dāng)ASA-2完全脫色時(shí), 離心(10000 r·min-1, 10 min, 4 ℃), 并用磷酸緩沖溶液(20 mmol·L-1, pH=7.0)洗滌3次, 棄上清液, 重懸于10 mL磷酸鹽緩沖溶液中.將制備的GF3菌懸液接入到不同的反應(yīng)體系中, 考察不同外加營養(yǎng)物質(zhì)、pH(5~10)、溫度(20~40 ℃)和轉(zhuǎn)速(0~250 r·min-1)對(duì)ASA-2脫色的影響.外加營養(yǎng)物質(zhì)成分如表 1所示, 其中將氨基酸按照S?rensen′s方法分為A1、A2、A3、A4, 共4組.

　　2.5 ASA-2脫色產(chǎn)物分析

　　最適條件下, 將菌株GF3接入含有100 mg·L-1的ASA-2的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中, 定時(shí)取樣, 測(cè)定不同時(shí)刻生物量和ASA-2濃度, 并進(jìn)行紫外-可見波譜掃描.同時(shí), 取100 mg·L-1 ASA-2降解過程中樣品, 在10000 r·min-1, 4 ℃下離心(AvantiTM J-30 I, Beckman, USA)分離10 min, 取上清液過0.22 μm濾膜, 進(jìn)行TOC(Multi N/C 2100S, Germany Jena)和高效液相色譜-質(zhì)譜分析(HP1100 LC/MSD, Agilent, USA).

　　高效液相色譜(HPLC)分析條件：流動(dòng)相超純水和甲醇(體積比)：

　　, UV檢測(cè)276 nm.色譜柱為Sino Chrom ODS-BP(內(nèi)徑5 μm, 尺寸4.6 mm × 250 mm), 進(jìn)樣量10 μL, 流速1.0 mL·min-1, 柱溫為40 ℃.

　　高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析條件：流動(dòng)相甲醇和超純水(含0.2%的乙酸和三乙胺), 甲醇體積分?jǐn)?shù)2%, 流速0.2 mL·min-1, 直接質(zhì)譜進(jìn)樣10 μL.電離方式ES-API(負(fù)模式), 檢測(cè)模式Full scan(50~600 amu), 電離電壓20 psig, 離子源溫度350 ℃, 去溶劑氣流量6.0 L·min-1.

　　2.6 菌株GF3降解底物廣譜性

　　最適條件下, 在外加20 mg·L-1的L-亮氨酸的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中, 加入不同的蒽醌化合物, 定時(shí)從反應(yīng)體系取樣, 測(cè)定蒽醌化合物的濃度變化.考察菌株GF3對(duì)其他蒽醌化合物的降解情況, 初步探索其降解底物廣譜性.

　　3 結(jié)果與討論

　　3.1 ASA-2脫色菌的分離與鑒定

　　經(jīng)過多次傳代馴化、反復(fù)平板涂布, 分離純化得到一株能夠有效脫色ASA-2的菌株, 命名為GF3.固體培養(yǎng)基上, 菌株GF3形成的菌落較小, 邊緣整齊, 呈圓形、淡紅色.掃描電鏡觀察結(jié)果如圖 1所示, GF3為球狀或短桿狀、無鞭毛, 大小約6~12 μm.該菌株對(duì)ASA-2有很強(qiáng)的脫色能力, 隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng), ASA-2原有的紅色逐漸褪去, 最后完全消失.

　　圖 1好氧培養(yǎng)菌株GF3的形態(tài)(×10000)

　　測(cè)定菌株GF3的16S rDNA序列, 并與GenBank數(shù)據(jù)庫中的序列比對(duì), 結(jié)果顯示菌株GF3和Rhodococcus pyridinivorans(NR025033、KF381498)的16S rDNA序列相似性達(dá)到100%.因此, 該菌株鑒定為嗜吡啶紅球菌(Rhodococcus pyridinivorans).將菌株序列提交至GenBank庫中, 獲得基因登錄序列號(hào)為KF953541.

　　3.2 脫色條件優(yōu)化3.2.1 外加營養(yǎng)物質(zhì)對(duì)ASA-2生物脫色的影響

　　菌株GF3能夠使ASA-2脫色, 但不能以它為唯一碳源生長(zhǎng).Fan等曾報(bào)道外加碳源如葡萄糖可提高鞘氨醇單胞菌FL對(duì)溴氨酸的脫色率.基于此, 本文研究了外加營養(yǎng)物質(zhì)酵母膏、蛋白胨、水解酪蛋白、葡萄糖和維生素混合物對(duì)ASA-2脫色的影響.實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖 2所示, 在22 h內(nèi), 外加蛋白胨、酵母膏和水解酪蛋白的反應(yīng)體系中ASA-2脫色率依次達(dá)到90%、81%和58%, 而外加葡萄糖和維生素混合物體系的脫色率與對(duì)照組相似, 僅為30%左右.可見, 蛋白胨、酵母膏和水解酪蛋白對(duì)ASA-2脫色有明顯促進(jìn)作用.

　　圖 2外加營養(yǎng)物質(zhì)對(duì)ASA-2脫色的影響

　　同時(shí), 含有這3種營養(yǎng)物質(zhì)的反應(yīng)體系中生物量也分別增長(zhǎng)了29、61和53 mg·L-1.雖然酵母膏和水解酪蛋白體系中菌株GF3的生物量都明顯高于蛋白胨體系, 但是ASA-2脫色率達(dá)到最高的卻是外加蛋白胨體系.Dong等曾報(bào)道蛋白胨可刺激紅環(huán)菌Rhodocyclus gelatinosus XL-1對(duì)蒽醌類化合物活性艷藍(lán)KN-R的生物降解, 進(jìn)而縮短降解所需的時(shí)間.推測(cè)蛋白胨中的營養(yǎng)成分可能提高了菌株的脫色活性.

　　3.2.2 不同氨基酸對(duì)ASA-2脫色的影響

　　蛋白胨的主要成分是氨基酸, 水解酪蛋白是酪蛋白經(jīng)酸水解后形成的氨基酸混合物, 酵母膏中也含有一些氨基酸, 因此推測(cè)氨基酸可能在加速ASA-2生物脫色過程中起到了重要作用.已有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一些氨基酸能夠加速特定污染物的生物降解.Ronen等在研究Achromobacter piechaudii TBPZ降解2, 4, 6-三溴苯酚過程中, 發(fā)現(xiàn)色氨酸和苯丙氨酸的加入大大提高了菌株TBPZ生物降解活性, 進(jìn)而加速了2, 4, 6-三溴苯酚的生物降解.Wu等曾報(bào)道, 氨基酸是加速伯克氏菌Burkholderia sp. GS3C對(duì)十六烷生物降解的主要影響因素.鑒于此, 考察了4組氨基酸混合物(A1、A2、A3、A4, 見表 1)對(duì)ASA-2脫色的影響, 結(jié)果如圖 3a所示.

　　圖 3外加氨基酸對(duì)ASA-2脫色的影響(A.氨基酸組合;B. A1中單個(gè)氨基酸)

　　4組氨基酸混合物均對(duì)菌株GF3脫色ASA-2有明顯促進(jìn)作用, 其促進(jìn)作用與500 mg·L-1蛋白棟相當(dāng)或者更優(yōu).A1、A2和A4的添加使ASA-2脫色率分別提高至94%、93%和99% (空白對(duì)照組22 h后ASA-2脫色率為35%).同時(shí), 菌株GF3的細(xì)胞濃度依次增長(zhǎng)了36、21和16 mg·L-1.可見, A1比其它實(shí)驗(yàn)組能夠更好地促進(jìn)菌株GF3的細(xì)胞增殖.因此, 對(duì)A1中單個(gè)氨基酸的影響分別進(jìn)行了研究, 結(jié)果如圖 3b所示.

　　A1中5種氨基酸均能在促進(jìn)ASA-2脫色的同時(shí)促進(jìn)菌株GF3自身細(xì)胞增殖.除了L-賴氨酸, 其它4種氨基酸體系A(chǔ)SA-2脫色率均達(dá)93%以上, 且與蛋白胨的促進(jìn)效果相當(dāng).并且這4種氨基酸也能較好地促進(jìn)細(xì)胞增殖.這種現(xiàn)象表明, 這4種氨基酸一方面可能是合成相關(guān)脫色酶的原料, 另一方面這些氨基酸可能通過促進(jìn)細(xì)胞的增殖來促進(jìn)ASA-2脫色.據(jù)報(bào)道, 鞘氨醇單胞菌降解溴氨酸和ASA-2的過程中, 只有脯氨酸的促進(jìn)效果與蛋白胨相似, 并且發(fā)現(xiàn)脯氨酸與脫色酶活性密切相關(guān).Ronen和Wu也曾報(bào)道少數(shù)氨基酸可加速難降解物質(zhì)的生物降解, 但單獨(dú)氨基酸的促進(jìn)作用都小于混合氨基酸的促進(jìn)作用.然而本實(shí)驗(yàn)A1組的L-谷氨酸、L-脯氨酸、L-纈氨酸和L-亮氨酸的添加對(duì)ASA-2脫色的促進(jìn)效果均與這4種氨基酸混合物的促進(jìn)效果相當(dāng), 不過細(xì)胞生長(zhǎng)量是明顯低于這4種氨基酸混合物體系.可見, 過多氨基酸的添加也僅僅是促進(jìn)了細(xì)胞更好的生長(zhǎng).

　　3.2.3 環(huán)境因素對(duì)ASA-2脫色的影響

　　pH、溫度和溶解氧是影響微生物生存與生長(zhǎng)以及對(duì)污染物降解的重要因素.在外加20 mg·L-1亮氨酸作為共代謝碳源的條件下, 考察了不同pH、溫度和搖床轉(zhuǎn)速對(duì)菌株GF3脫色ASA-2的影響.實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖 4所示.

　　圖 4不同環(huán)境因子對(duì)ASA-2脫色的影響

　　當(dāng)培養(yǎng)基初始pH在7.0~8.5之間時(shí), ASA-2的脫色率最高, 達(dá)90%以上.其中pH為8.0時(shí), 反應(yīng)體系中細(xì)胞濃度最高.當(dāng)初始pH值在8.5~9.0范圍內(nèi)菌株GF3仍然生長(zhǎng)良好, 一方面表明該菌株對(duì)偏堿環(huán)境具有較強(qiáng)的適應(yīng)能力, 另一方面也可能是因?yàn)锳SA-2脫色過程中產(chǎn)生了偏酸性產(chǎn)物造成.在測(cè)定的20~40 ℃范圍內(nèi), ASA-2脫色的最適宜溫度為30 ℃, 脫色率達(dá)到95%, 菌株GF3細(xì)胞濃度也達(dá)到最高.過高或過低的溫度, 都使ASA-2脫色率和細(xì)胞生長(zhǎng)量明顯下降.ASA-2脫色的適宜轉(zhuǎn)速范圍在150~200 r·min-1之間, 此時(shí)ASA-2脫色率達(dá)90%以上, 菌株GF3生長(zhǎng)也最好.綜合考慮環(huán)境因素影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果, ASA-2脫色的適宜環(huán)境條件為pH 8.0、30 ℃和150 r·min-1.

　　3.3 菌株GF3脫色ASA-2的產(chǎn)物分析3.3.1 ASA-2的生物脫色過程

　　最適條件下, 研究了ASA-2的生物脫色過程, 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖 5所示.反應(yīng)開始6 h內(nèi), ASA-2的脫色率只有3%, 含有ASA-2和亮氨酸體系的細(xì)胞生長(zhǎng)速率和只含有亮氨酸體系的細(xì)胞生長(zhǎng)速率基本一致.可見, 這期間主要是亮氨酸促進(jìn)了細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖.6 h后, ASA-2開始快速脫色, 菌株GF3快速增長(zhǎng), 到30 h ASA-2脫色率已經(jīng)達(dá)95%以上, 此時(shí)細(xì)胞濃度增加到49 mg·L-1(0 h為20 mg·L-1), 并且明顯高于只有亮氨酸作為碳源的對(duì)照體系.由此推測(cè)菌株GF3可能利用了ASA-2的脫色產(chǎn)物來生長(zhǎng).在隨后30~33 h內(nèi), ASA-2脫色率不變, 細(xì)胞略有增長(zhǎng), 推測(cè)這一階段細(xì)胞也是利用中間代謝產(chǎn)物進(jìn)行生長(zhǎng).

　　圖 5 ASA-2脫色過程曲線

　　取脫色過程中的樣品, 稀釋5倍進(jìn)行紫外-可見波譜分析, 結(jié)果如圖 6所示.隨著反應(yīng)的進(jìn)行, ASA-2在紫外光區(qū)227、248 nm處和可見光區(qū)475 nm處的特征吸收峰逐漸減弱, 最終完全消失, 這與反應(yīng)液的顏色由紅色漸變?yōu)闊o色相一致.由此推斷ASA-2蒽醌環(huán)結(jié)構(gòu)被破壞, 發(fā)色基團(tuán)發(fā)生明顯變化.同時(shí)在340 nm處逐漸產(chǎn)生了新的特征吸收峰, 峰值逐漸增大.并且, 在475 nm處的特征吸收峰完全消失時(shí), 340 nm處的峰值達(dá)到最大.這一現(xiàn)象說明, 在ASA-2的脫色過程中有產(chǎn)物生成, 且不能夠被菌株GF3利用.

　　圖 6 ASA-2脫色過程的紫外-可見波譜

　　與鞘氨醇單胞菌QYY脫色ASA-2不同, 本實(shí)驗(yàn)在340 nm處產(chǎn)生了新的特征吸收峰, 且吸收峰強(qiáng)度達(dá)最大后不再減弱.而菌株QYY脫色ASA-2過程中是在375 nm處出現(xiàn)了新峰, 并且隨著脫色時(shí)間的推移, 375 nm處的吸收峰逐漸減弱.因此推測(cè)菌株GF3和QYY在對(duì)ASA-2的脫色過程中, 蒽醌環(huán)斷裂的方式可能不同, 導(dǎo)致最終降解產(chǎn)物也不相同, ASA-2被菌株GF3脫色后生成新的化合物.

　　實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步測(cè)定了108 mg·L-1 ASA-2脫色過程中總有機(jī)碳TOC(扣除了L-亮氨酸的TOC值)的變化.在培養(yǎng)36 h的過程中, 總有機(jī)碳由最初的53 mg·L-1, 逐漸減少為20 mg·L-1, 總有機(jī)碳降低了約62%.并且隨著反應(yīng)時(shí)間的推移, 總有機(jī)碳不再變化.可見, 菌株GF3只利用了部分有機(jī)碳, 并未將ASA-2完全礦化.

　　3.3.2 ASA-2脫色產(chǎn)物分析

　　對(duì)ASA-2完全脫色后的樣品進(jìn)行液相色譜-質(zhì)譜分析, 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖 7所示, ASA-2脫色終產(chǎn)物質(zhì)荷比為260, 初步推測(cè)產(chǎn)物為3-氨基-4-磺酸基鄰苯二甲酸.這與菌株QYY降解ASA-2的終產(chǎn)物不同.并由此推測(cè)菌株GF3裂解蒽醌環(huán)的方式與以往文獻(xiàn)報(bào)道的蒽醌環(huán)裂解方式不同.可見, 菌株GF3通過一種新的降解途徑將ASA-2降解.

　　圖 7 ASA-2降解終產(chǎn)物的液相-質(zhì)譜圖

　　3.3.3 菌株GF3降解底物廣譜性

　　在外加20 mg·L-1的L-亮氨酸的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中, 加入不同的蒽醌化合物, 定時(shí)從反應(yīng)體系取樣, 測(cè)定蒽醌化合物的濃度變化.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示, 除了1-氨基蒽醌-2-磺酸外, 菌株GF3還能夠降解100 mg·L-1的溴氨酸、蒽醌-2-磺酸鈉和蒽醌-2-羧酸, 使它們的降解率分別達(dá)到90%、99%和94%.但是, 菌株GF3不能夠降解蒽醌-2, 6-二磺酸鈉、活性艷藍(lán)KN-R和茜素紅.具體參見 污水處理技術(shù)資料或污水技術(shù)資料更多相關(guān)技術(shù)文檔。

　　4 結(jié)論

　　1)新分離出一株1-氨基蒽醌-2-磺酸降解菌株, 鑒定為嗜吡啶紅球菌(Rhodococcus pyridinivorans).

　　2)蛋白胨、酵母膏、水解酪蛋白可加速菌株GF3脫色ASA-2, 其中蛋白胨促進(jìn)效果最好.單個(gè)氨基酸中L-亮氨酸對(duì)ASA-2生物脫色的促進(jìn)效果最好, 同時(shí)能顯著促進(jìn)菌株GF3的細(xì)胞增殖.ASA-2生物脫色的最適環(huán)境條件為：pH 8.0、30 ℃和150 r·min-1.30 h內(nèi)菌株可使108 mg·L-1 ASA-2降解率達(dá)95%, 總有機(jī)碳去除率62%.

　　3)菌株GF3能夠使ASA-2的蒽醌環(huán)裂解, 終產(chǎn)物為3-氨基-4-磺酸基鄰苯二甲酸.菌株GF3不僅能降解1-氨基蒽醌-2-磺酸, 還能夠降解溴氨酸、蒽醌-2-磺酸鈉和蒽醌-2-羧酸.但是菌株GF3不能夠降解蒽醌-2, 6-二磺酸鈉、活性艷藍(lán)KN-R和茜素紅.